1. INTRODUCCIÓN: DE EXCEDENTE ASISTENCIAL A RECURSO CIENTÍFICO

Un biobanco no es un congelador grande ni un archivo pasivo de tubos. Es una organización que recibe, procesa, conserva y distribuye muestras biológicas humanas y datos asociados bajo una gobernanza definida, con criterios de calidad, seguridad, legalidad y acceso científico. Su producto real no es el tubo: es una unidad biológica caracterizada, trazable y apta para una finalidad. Una muestra sin historia preanalítica puede seguir físicamente congelada y, sin embargo, haber perdido buena parte de su valor experimental. Del mismo modo, una muestra técnicamente excelente no puede utilizarse si carece del marco ético o documental necesario.

El especialista en Anatomía Patológica ocupa una posición central porque muchas muestras proceden del circuito diagnóstico. Debe proteger primero la atención del paciente, seleccionar material representativo sin comprometer el diagnóstico, decidir la forma de conservación y documentar qué fracción pasa al biobanco. Esta función exige integrar morfología, biología molecular, preanalítica, sistemas de información, normativa y prevención de riesgos. El tejido tumoral congelado, por ejemplo, solo es útil si se sabe de qué lesión procede, cuánto tumor contiene, qué necrosis presenta, cuánto tiempo estuvo isquémico, cómo se estabilizó y qué tratamientos recibió el paciente.

La calidad comienza antes de la extracción. La preparación del paciente, la hora, el anticoagulante, el tipo de recipiente, la isquemia, la temperatura y el intervalo hasta el procesado pueden modificar células, metabolitos, ARN, proteínas fosforiladas y ADN circulante. El procesamiento posterior no restaura lo que ya se degradó. Por eso las buenas prácticas de ISBER, quinta edición de 2023, y las NCI Best Practices for Biospecimen Resources, cuarta edición publicada en enero de 2026, insisten en estandarizar y registrar los factores preanalíticos relevantes para la finalidad prevista ¹¹¹².

Debes pensar siempre en dos ejes. El primero es la cadena de custodia: quién obtiene, recibe, transforma, almacena, selecciona, envía y devuelve. El segundo es la cadena de aptitud: qué cambios sufre el material y para qué análisis continúa siendo válido. La trazabilidad reconstruye el pasado; la aptitud para el uso determina el futuro. Ambas convergen en el sistema de gestión de calidad.

2. CONCEPTOS Y REGÍMENES DE ALMACENAMIENTO

2.1. Muestra, alícuota, derivado y datos asociados

La muestra biológica es material humano susceptible de conservar información sobre la persona: tejido, sangre, plasma, suero, médula ósea, orina, saliva, líquido cefalorraquídeo, células, ADN o ARN, entre otros. Una alícuota es una fracción separada de una muestra manteniendo una relación padre-hijo. Un derivado resulta de una transformación: ADN extraído, ARN, proteínas, células cultivadas, portaobjetos, bloque de parafina o imagen digital vinculada. Cada operación crea una nueva entidad trazable, no un simple cambio de ubicación.

Los datos clínicos, patológicos y preanalíticos determinan el significado del material. Un tubo etiquetado como «plasma» es insuficiente si no constan anticoagulante, número de centrifugaciones, demora, temperatura y episodios de congelación-descongelación. En tejido, la etiqueta «tumor» no sustituye a la localización, diagnóstico, porcentaje tumoral, necrosis y método de preservación. El biobanco debe aplicar minimización: recoger los datos necesarios para la finalidad autorizada y protegerlos de accesos no justificados.

2.2. Tres regímenes que no deben confundirse

El Real Decreto 1716/2011 distingue tres marcos de almacenamiento y uso ². La diferencia no es terminológica: cambia el alcance del consentimiento, la gobernanza y la posibilidad de reutilización.

En el biobanco, el artículo 70 de la Ley 14/2007 permite que las muestras se utilicen para investigación biomédica dentro de los términos del consentimiento y de la ley; el Real Decreto concreta la evaluación de cada cesión. Esto no equivale a «uso libre». El consentimiento no reemplaza la aprobación ética, la evaluación científica, la protección de datos ni el acuerdo de transferencia. En un proyecto concreto, por el contrario, no puede presumirse una reutilización indefinida porque el material siga almacenado.

2.3. Codificación, seudonimización y anonimización

Una muestra identificada incorpora directamente datos que permiten reconocer a la persona. En una muestra codificada o seudonimizada, los identificadores directos se sustituyen por un código, pero existe información adicional que puede restablecer el vínculo bajo controles. Sigue siendo dato personal: la seudonimización reduce riesgo, no saca el material del ámbito de protección de datos. Una muestra anonimizada de modo irreversible no puede razonablemente atribuirse a una persona mediante los medios disponibles. Hay que evitar llamar «anónima» a cualquier etiqueta alfanumérica.

La seudonimización permite actualizar información clínica, gestionar la retirada del consentimiento y comunicar hallazgos cuando proceda, pero exige separar la clave de reidentificación, limitar privilegios y registrar accesos. La anonimización puede reducir riesgos de privacidad, aunque también elimina esas capacidades. La elección debe responder al protocolo y a la gobernanza, no a la comodidad informática.

2.4. Custodia, no apropiación

Las muestras humanas no se tratan como propiedad comercial del servicio, investigador o patrocinador. La Ley 14/2007 establece gratuidad de la donación y ausencia de carácter lucrativo; la cesión puede repercutir únicamente costes de obtención, mantenimiento, manipulación, envío y otros servicios asociados ¹. Hablar de custodia responsable ayuda a entender que el biobanco administra un recurso donado bajo condiciones, derechos y supervisión.

3. MARCO LEGAL, ÉTICO Y DOCUMENTAL

3.1. Normas vinculantes y su función

En España, la norma nuclear es la Ley 14/2007, de Investigación biomédica, especialmente sus disposiciones sobre obtención, utilización, conservación y cesión de muestras humanas y sobre biobancos ¹. El Real Decreto 1716/2011 desarrolla autorización, funcionamiento, registro, tratamiento de muestras y tres regímenes de almacenamiento ². En Andalucía, el Decreto 1/2013 regula la autorización y funcionamiento de biobancos con fines de investigación y crea el Biobanco del Sistema Sanitario Público de Andalucía como estructura en red ³.

El Reglamento (UE) 2016/679 y la Ley Orgánica 3/2018 regulan los datos personales, incluidos los de salud y genéticos, con salvaguardas específicas para investigación ¹⁹²⁰. En prevención laboral, el Real Decreto 664/1997 se aplica a exposición a agentes biológicos y el Real Decreto 665/1997, tras su actualización por el Real Decreto 612/2024, a agentes cancerígenos, mutágenos o reprotóxicos, relevante para formaldehído ¹⁴¹⁵. Estas normas son obligatorias; ISO 20387, ISBER, NCI y WHO aportan estándares o recomendaciones técnicas y no deben presentarse como leyes.

3.2. Consentimiento e información

Como regla, la obtención y utilización para investigación requieren información previa y consentimiento escrito. La información debe permitir comprender finalidad, lugar de análisis, destino al finalizar, consecuencias previsibles, posibles contactos, tratamiento de datos, cesiones, derecho a retirar el consentimiento y, cuando sea pertinente, manejo de resultados relevantes. El consentimiento para incorporar muestras a un biobanco puede cubrir futuras líneas compatibles con los términos explicados; cada uso concreto sigue sometido a evaluación y a las condiciones del biobanco.

La Ley 14/2007 contempla condiciones excepcionales para utilizar muestras codificadas o identificadas sin consentimiento cuando obtenerlo sea imposible o represente un esfuerzo no razonable y concurran requisitos estrictos, incluida valoración favorable del comité de ética y ausencia de objeción expresa, entre otros. No es una vía rutinaria para corregir documentación deficiente. Debe quedar motivada y aprobada para el supuesto concreto.

3.3. Revocación

El consentimiento es revocable. Si la persona retira la autorización para todo uso, las muestras afectadas dejan de utilizarse conforme al alcance de la revocación y se destruyen o se gestionan según la norma y el procedimiento. La revocación no puede borrar material ya consumido ni obliga a eliminar resultados y datos obtenidos legítimamente en investigaciones ya realizadas; la Ley 14/2007 preserva esos datos. La actuación debe documentarse en todos los sistemas y localizaciones para evitar nuevas cesiones.

3.4. Prioridad asistencial y selección del excedente

El artículo 25 del Real Decreto 1716/2011 protege la prioridad diagnóstica y terapéutica. El profesional responsable determina qué porción puede dedicarse a investigación una vez garantizadas las necesidades asistenciales. En Anatomía Patológica, esto implica preservar bloque diagnóstico, márgenes, material para biomarcadores actuales y una reserva razonable ante pruebas futuras previsibles. La selección debe realizarla personal competente y quedar ligada al informe y a la pieza.

El excedente diagnóstico es una fuente frecuente y eficiente, pero no la única. También pueden existir obtenciones prospectivas o específicas para biobanco, siempre con justificación, consentimiento y seguridad. Por eso la respuesta oficial de 2018 que identificó muestras destinadas a biobanco con excedentes del diagnóstico debe estudiarse dentro de sus opciones, no como definición exhaustiva de toda muestra biobancada.

3.5. Evaluación ética, científica y cesión

Todo proyecto que use muestras humanas requiere el marco ético aplicable. El comité de ética de la investigación evalúa protocolo, balance riesgo-beneficio, consentimiento, privacidad y manejo de hallazgos. En un biobanco, los comités externos científico y ético intervienen en la gobernanza; la cesión se formaliza por escrito, suele realizarse de forma anonimizada o codificada según necesidad y debe limitarse a la cantidad mínima necesaria. El receptor acepta finalidad, seguridad, no reidentificación indebida, límites de redistribución, reconocimiento del recurso y devolución o destrucción del remanente cuando proceda ⁵.

El BB-SSPA solicita documentación del proyecto y articula la evaluación de disponibilidad, viabilidad, ética y ciencia. Su guía de uso describe el circuito documental, y la guía andaluza para presentación al CEI, actualizada en 2023, recuerda que los proyectos con muestras humanas deben obtener dictamen favorable y aportar memoria, compromisos y documentación de consentimiento o justificación aplicable ⁶⁹. «Estar registrado», expresión de una pregunta oficial de 2025, debe entenderse en el circuito administrativo correspondiente; el requisito jurídico central es el dictamen favorable y la tramitación conforme al sistema aplicable, no un registro abstracto idéntico para cualquier estudio.

4. BIOBANCO DEL SISTEMA SANITARIO PÚBLICO DE ANDALUCÍA

4.1. Estructura en red y gobernanza

El Decreto 1/2013 crea el Biobanco del Sistema Sanitario Público de Andalucía (BB-SSPA) como biobanco en red, dependiente de la Consejería competente en salud e integrado por nodos de centros sanitarios públicos andaluces ³. La red permite acercar captación y procesamiento a la asistencia, compartir procedimientos y ofrecer un catálogo común. Dispone de dirección, Consejo Rector y comités externos científico y ético. Estos órganos separan gestión cotidiana, estrategia, evaluación de mérito y protección de derechos.

Las páginas institucionales actuales sitúan la gestión operativa de plataformas de investigación en la Fundación Progreso y Salud. De ahí que la plantilla SAS de 2025 señale a la Fundación Progreso y Salud como organismo coordinador. No debe confundirse esa coordinación operativa con la dependencia formal prevista en el Decreto 1/2013. En una respuesta desarrollada conviene expresar ambos planos y citar su fuente.

El Decreto andaluz 49/2017 distingue el área clínica de tejidos y células destinados a aplicación en humanos del área de muestras para investigación ⁴. Es una frontera importante: un tejido crioconservado para investigación no queda automáticamente habilitado para uso terapéutico, que exige su propia normativa de calidad y seguridad. El biobanco de investigación y el establecimiento de tejidos pueden compartir entorno o conocimiento, pero no régimen ni finalidad.

4.2. Servicios y catálogo

El BB-SSPA ofrece obtención, procesamiento, almacenamiento, control de calidad y provisión de muestras y datos. Su catálogo institucional describe tejido congelado, fijado e incluido en parafina, OCT, plasma, suero, células mononucleares, ácidos nucleicos, preparaciones histológicas y servicios de apoyo, entre otros ⁷. La cartera concreta depende de los nodos y se consulta antes de diseñar el estudio. El biobanco puede organizar captación prospectiva cuando la colección existente no cubre fenotipo, matriz o volumen requeridos.

La calidad no se presume por pertenecer a una red. Se verifica mediante procedimientos comunes, formación, controles internos y externos, indicadores y trazabilidad. La información institucional del BB-SSPA declara un sistema de gestión certificado conforme a ISO 9001:2015 y participación en controles externos para determinados productos y servicios ⁷. ISO 9001 acredita un sistema de gestión certificado dentro de un alcance; no demuestra por sí sola que toda muestra sea apta para cualquier ensayo.

4.3. Flujo de acceso

La solicitud debe describir diagnóstico, criterios de inclusión y exclusión, matriz, formato, cantidad, calidad, datos asociados, técnica prevista y calendario. Pedir «cien tumores» no basta: un estudio de ARN necesita condiciones diferentes de uno morfológico; una cohorte de cáncer requiere subtipo, tratamiento y quizá controles. El biobanco evalúa si puede satisfacer el uso sin agotar injustificadamente un recurso limitado y puede proponer menos material, otro derivado o captación prospectiva.

4.4. nSIBAI y trazabilidad de red

En 2025 el BB-SSPA presentó nSIBAI como sistema de información para mejorar la trazabilidad de muestras y datos desde donación hasta uso en investigación ⁸. Un sistema común facilita localizar inventario distribuido, gestionar consentimientos, relacionar alícuotas y registrar cesiones. Su valor depende de la calidad de entrada: un código escaneado no corrige una hora de isquemia inventada ni un diagnóstico sin actualizar.

5. CIRCUITO INTEGRAL Y CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

5.1. Planificar antes de captar

Una colección útil se diseña desde la pregunta científica. El plan define población, controles, matrices, cantidad mínima, derivados, variables clínicas, técnica analítica prevista, puntos temporales, seguimiento, consentimiento, logística, presupuesto y final de la colección. También identifica qué variación puede tolerarse. Si el objetivo son metabolitos lábiles, la demora y temperatura pesan más que en un estudio puramente morfológico; si se pretende cultivar células, viabilidad y esterilidad dominan; si se analiza ADN germinal, la celularidad tumoral es irrelevante, pero identidad y contaminación siguen siendo críticas.

La captación sin plan produce inventarios grandes y poco utilizables. Cada tubo ocupa espacio, genera costes y puede consumir material limitado. Antes de aceptar una nueva serie conviene comprobar demanda, singularidad, posibilidad de completar datos y sostenibilidad. La revisión periódica del inventario identifica muestras sin consentimiento operativo, sin metadatos suficientes, agotadas o sin expectativa razonable de uso, y permite una disposición gobernada.

5.2. Obtención y transporte al biobanco

El kit de obtención debe corresponder al tipo de muestra y contener recipientes compatibles, etiquetas, instrucciones, absorbente, documentación y condiciones de transporte. Se registran identidad, episodio, localización, fecha y hora, profesional, tipo de recipiente, aditivo, estado preanalítico y cualquier desviación. La hora real no se reemplaza por la de impresión de la etiqueta. En una resección, se diferencian interrupción del riego, extracción del órgano, recepción y estabilización; esas marcas permiten calcular isquemia caliente y fría de forma reproducible.

El transporte mantiene contención y estabilidad. La muestra viaja cerrada, en posición y temperatura definidas, con documentación separada y cadena de custodia. Si el transporte se monitoriza, el registrador debe estar colocado en una posición representativa y su intervalo configurado. Una lectura al llegar no demuestra que no hubo excursión durante el trayecto.

5.3. Recepción, verificación y decisión

La recepción compara muestra, solicitud, consentimiento y plan. Se verifican identificadores, tipo, número de recipientes, volumen o peso, integridad, fuga, temperatura si procede, tiempo, anticoagulante o conservante y documentación. La inspección se realiza con medidas de bioseguridad: el exterior puede estar contaminado y un recipiente presurizado no se abre frente a la cara. A cada entrada se asigna un identificador único no derivado de iniciales, fecha de nacimiento o número clínico visible.

El rechazo no es la única respuesta a una no conformidad. Una muestra puede aceptarse condicionadamente para un uso menos exigente, siempre que la desviación sea visible al investigador y no se comprometan seguridad ni derechos. Por ejemplo, un plasma con demora no documentada puede no ser apto para un biomarcador lábil, aunque sí para un análisis previamente validado como robusto. La decisión debe basarse en el uso, no en la apariencia del tubo.

5.4. Registro, cuarentena y liberación

La cuarentena separa material pendiente de consentimiento, control, identidad o revisión. Puede ser física, lógica o ambas, pero debe impedir la cesión accidental. La liberación requiere criterio definido y usuario autorizado. El sistema registra fecha, responsable y evidencia. Los materiales potencialmente infecciosos o con restricciones especiales necesitan además ubicación y señalización compatibles con la evaluación de riesgo.

5.5. Procesamiento y alicuotado

El procesamiento debe minimizar demora, contaminación y ciclos de temperatura. Se trabaja por lotes compatibles y con material previamente identificado. Antes de dividir, se mezcla de manera apropiada para la matriz sin causar hemólisis, espuma o daño celular. Cada alícuota recibe etiqueta resistente a la conservación prevista y queda enlazada a su progenitor, volumen o cantidad, operador, hora, equipo, reactivos y ubicación. Las alícuotas pequeñas permiten usos independientes y reducen descongelaciones repetidas, pero multiplican tubos, espacio y riesgo de error; el tamaño se ajusta a la demanda previsible.

6. VARIABLES PREANALÍTICAS Y APTITUD PARA EL USO

6.1. Principio de fit for purpose

No existe una única definición de «muestra de calidad». La calidad es la capacidad de cumplir requisitos para un uso. Un tejido bien preservado para morfología puede tener ARN fragmentado; un plasma válido para anticuerpos puede ser inadecuado para ADN tumoral circulante si contiene ADN genómico liberado por leucocitos; células con ADN íntegro pueden no ser viables. Por ello, el biobanco debe asociar cada control con una finalidad y comunicar lo que realmente se ha medido.

ISBER 2023 y NCI 2026 recomiendan documentar factores preanalíticos críticos y validar condiciones por tipo de muestra y analito ¹¹¹². Sistemas de codificación preanalítica, como SPREC, ayudan a comparar colecciones, pero no sustituyen el registro detallado ni la validación local. «Procesado según protocolo» tampoco basta si el protocolo cambió y no se conserva su versión.

6.2. Variables comunes

6.3. Isquemia y estabilización

La isquemia caliente comprende el periodo en que el tejido permanece a temperatura corporal con perfusión reducida o ausente; la isquemia fría, desde la extracción o interrupción completa del aporte hasta la estabilización, según la definición del procedimiento. En una resección compleja no basta con una sola hora. Registrar pinzamiento, extracción, llegada a Anatomía Patológica y congelación o fijación permite reconstruir el intervalo y compararlo entre centros.

Los efectos son analito-dependientes: la morfología puede seguir aceptable cuando rutas de fosforilación o transcritos ya cambiaron. No debe inventarse un límite universal. El plan define objetivos basados en evidencia y clasifica desviaciones. En estudios multicéntricos, un intervalo modestamente diferente entre casos y controles puede crear una señal falsa mayor que la biológica.

6.4. Homogeneidad y representatividad

Dividir no garantiza equivalencia. El tejido tumoral es heterogéneo; una mitad puede ser necrótica y otra viable. La sangre puede sedimentar y un fluido contener coágulos o agregados. La estrategia combina inspección, mezcla apropiada, muestreo espacial y control histológico. En tejidos, una sección espejo o adyacente permite estimar tumor, necrosis, inflamación y tejido normal; esa información se atribuye a la porción concreta, no a toda la pieza sin cautela.

6.5. Prevención de sesgo

El biobanco debe mirar también la cohorte. Si solo se conservan tumores grandes, intervenciones diurnas o muestras de un hospital, el inventario puede no representar la población. Registrar por qué una muestra no se obtuvo o fue rechazada ayuda a evaluar sesgo. Los controles deben compartir condiciones preanalíticas relevantes con los casos; comparar tumores congelados inmediatamente con controles fijados durante horas confunde enfermedad y procesamiento.

7. PROCESAMIENTO DE TEJIDOS SÓLIDOS

7.1. Selección sin comprometer el diagnóstico

El tejido llega primero al circuito asistencial. Se verifica identidad, orientación, localización y estado de la pieza; el patólogo selecciona áreas representativas después de reservar lo necesario para diagnóstico, estadificación, márgenes y biomarcadores. En piezas pequeñas, biopsias y lesiones completamente incluidas, puede no existir excedente. «Biobancar» no es sinónimo de tomar siempre una porción.

La muestra se describe y, cuando procede, se fotografía o cartografía antes de dividir. El muestreo emparejado de tumor y tejido no tumoral requiere confirmar que la supuesta normalidad es anatómica e histológica; «alejado del tumor» no implica ausencia de inflamación, displasia, campo molecular o tratamiento. Cada fragmento debe ser suficientemente pequeño para estabilizarse de forma uniforme, pero no tan pequeño que impida control morfológico o usos previstos.

7.2. Opciones de preservación

La congelación rápida puede realizarse mediante sistemas validados que maximicen transferencia térmica y minimicen riesgo. El contacto directo con nitrógeno líquido no es una regla universal: plantea ebullición, salpicadura y posible contaminación cruzada. El método, recipiente y tamaño del fragmento deben estar definidos. El tejido se coloca después en almacenamiento estable sin permitir un calentamiento intermedio durante etiquetado o inventario.

En FFPE, «formol» es una descripción incompleta. Deben constar tipo y concentración del fijador —habitualmente formalina tamponada neutra en protocolos diagnósticos—, relación aproximada fijador-tejido, grosor, inicio y duración de fijación, temperatura, procesador y parafina cuando sean relevantes. La sobre- e infra-fijación afectan morfología y biomoléculas. Los intervalos aceptables dependen de tejido, ensayo y guía específica; no se trasladan sin validación de un biomarcador a todos los usos de biobanco.

7.3. Control morfológico

El control histológico confirma identidad de tejido y contenido: tipo de lesión, porcentaje de células tumorales, necrosis, fibrosis, inflamación, mucina y contaminación por tejido vecino. Se realiza sobre sección adyacente o espejo, indicando la relación espacial. La estimación de celularidad tumoral debe definir si se refiere a núcleos tumorales entre núcleos totales o a área, porque no son equivalentes. Para análisis molecular, el patólogo puede marcar macro- o microdisección y comunicar pureza mínima exigida por la plataforma.

Los bloques y criomoldes conservan orientación. La sección de control no debe agotar una muestra mínima. Si se hacen múltiples derivados, el LIMS registra qué corte precede a cada extracción y cuántos niveles quedan. NCI 2026 recomienda conservar bloques FFPE antes que series de portaobjetos precortados para almacenamiento molecular prolongado, porque los cortes expuestos envejecen y ofrecen menos flexibilidad ¹².

7.4. Tejido calcificado y materiales problemáticos

La descalcificación altera ácidos nucleicos y antígenos en grado dependiente del agente, concentración y tiempo. Si se prevé investigación molecular, se separa antes una porción no calcificada cuando sea asistencialmente posible. El registro debe indicar el método; «descalcificado» sin producto ni duración no permite interpretar un fallo. Tejidos grasos, fibrosos, mucinosos o hemorrágicos requieren estrategias de división y control específicas para evitar alícuotas no representativas.

8. SANGRE, MÉDULA Y OTROS FLUIDOS BIOLÓGICOS

8.1. La elección del tubo es analítica

El aditivo se selecciona por el producto y ensayo. EDTA conserva células y es frecuente para ADN y hematología, pero quelata cationes; citrato se emplea en coagulación y exige relación de llenado; heparina puede interferir con amplificación; los tubos sin anticoagulante permiten formar coágulo y obtener suero; los tubos estabilizadores incorporan conservantes con efectos propios. No se memoriza el color del tapón como regla universal, porque fabricantes y circuitos pueden variar. Se registra el aditivo real.

La venopunción puede causar hemólisis, activación plaquetaria, contaminación tisular y variación por torniquete o postura. Se documenta ayuno u otras condiciones solo cuando son relevantes. Tras la obtención, el tubo se mezcla según instrucciones, sin agitación vigorosa. El tiempo hasta separación y la temperatura se controlan; dejar sangre en contacto con células cambia concentraciones y libera componentes intracelulares.

8.2. Suero y plasma

Para suero se permite coagulación en condiciones definidas antes de centrifugar. Para plasma se evita coagulación y se separan células de manera reproducible. La centrifugación se especifica en fuerza centrífuga relativa (×g), no solo en rpm, porque la fuerza depende del radio del rotor. Se registran tiempo, temperatura, freno y número de ciclos. El sobrenadante se retira sin perturbar la capa celular y se distribuye en alícuotas.

La hemólisis no es únicamente un problema visual: libera hemoglobina, potasio, enzimas, microARN y ADN, y puede sesgar múltiples ensayos. Conviene registrar un índice objetivo cuando exista, junto con lipemia o ictericia relevantes. La aceptabilidad depende del analito. Un plasma rosado no se descarta de forma automática ni se entrega como normal: se clasifica según criterio validado.

8.3. ADN libre circulante y componentes celulares

En estudios de ADN libre circulante, la contaminación por ADN genómico de leucocitos es crítica. Se controla demora, tubo, temperatura y estrategia de centrifugación; pueden emplearse tubos estabilizadores validados cuando no es posible procesar pronto. Una segunda centrifugación puede reducir restos celulares, pero parámetros y tiempo deben validarse para la plataforma. El plasma no se descongela repetidamente: se alícuota pensando en el volumen por ensayo.

La capa leucoplaquetaria puede conservarse como fuente de ADN germinal; debe separarse sin contaminación cruzada y enlazarse con plasma, células y donante. Para células mononucleares se usa una separación apropiada, se cuentan células, se evalúan viabilidad y recuperación y se procede a criopreservación controlada. La médula ósea exige además considerar dilución con sangre periférica, anticoagulante, sospecha diagnóstica y prioridad de citometría, citogenética o biología molecular asistencial.

8.4. Orina, saliva, LCR y líquidos cavitarios

Cada fluido tiene composición y estabilidad distintas. La orina cambia con pH, bacterias y tiempo; saliva y muestras bucales pueden contaminarse con alimentos, microorganismos o sangre; el líquido cefalorraquídeo suele ser paucicelular y las células degeneran con rapidez; los derrames pueden contener coágulos ricos en células. Se registra volumen recibido, aspecto, método de obtención, conservante, tiempo y fracciones realizadas. El sedimento, sobrenadante, coágulo y citobloque son derivados diferentes y deben conservar su genealogía.

9. CÉLULAS VIABLES, CULTIVOS Y MATERIALES ESPECIALES

9.1. Criopreservación de células

Conservar células viables exige controlar concentración, medio, crioprotector, velocidad de enfriamiento, temperatura final y descongelación. El dimetilsulfóxido (DMSO) es un crioprotector frecuente, pero resulta tóxico en función de concentración, tiempo y temperatura; se añade y retira conforme a procedimiento, con exposición minimizada. La congelación a velocidad controlada limita cristales intracelulares. Tras alcanzar la temperatura definida, los viales pasan al almacenamiento criogénico sin excursiones innecesarias.

La descongelación forma parte del método, aunque la realice el usuario. Se registra calentamiento, dilución o lavado, recuperación y viabilidad. Una viabilidad elevada no demuestra función ni composición. En PBMC, pueden variar subpoblaciones; en células tumorales, capacidad proliferativa y clones. Cuando el uso lo exige, se ensayan función, inmunofenotipo o recuperación tras descongelación, no solo tinción de exclusión inmediata.

9.2. Líneas celulares, cultivos primarios y organoides

Una línea debe conservar identidad, origen, consentimiento, paso, medio, condiciones, modificaciones y resultados de control. La autenticación por perfiles STR es habitual para líneas humanas y la detección de micoplasma debe realizarse antes de liberar o distribuir. Se establece un banco maestro y bancos de trabajo para reducir deriva genética y fenotípica. La morfología por sí sola no autentica una línea.

Los cultivos primarios y organoides añaden heterogeneidad, selección por el medio y riesgo de contaminación. Se documentan tejido de origen, digestión, matriz, factores, tiempo, paso y criopreservación. Las matrices de origen animal o composición no definida pueden limitar ciertos usos; el investigador debe conocerlas. La esterilidad no se presume por ausencia de turbidez.

9.3. Microorganismos y microbioma

Si la finalidad incluye microbioma, la contaminación ambiental y de reactivos puede dominar en muestras de baja biomasa. Se planifican controles negativos de obtención, extracción y biblioteca, y se registran lote y operador. Los conservantes y ciclos de congelación alteran perfiles. Si se cultivan agentes, la evaluación de riesgo biológico y el nivel de contención corresponden al microorganismo y procedimiento; el circuito de biobanco no rebaja esas exigencias.

9.4. Ácidos nucleicos y otros derivados

La extracción crea un derivado con método, lote, cantidad, concentración, pureza, integridad y volumen propios. La absorbancia puede sobreestimar por contaminantes y no demuestra amplificabilidad; la fluorometría es más específica para el ácido nucleico diana, pero tampoco informa de fragmentación. La electroforesis o índices de integridad complementan según uso. Para ADN muy fragmentado o cfDNA se selecciona una métrica adecuada a su tamaño, no un RIN, que corresponde a ARN.

Los derivados deben dividirse para evitar descongelación repetida y conservar un remanente. La normalización de concentración puede introducir errores de pipeteo y contaminación, por lo que se registra cálculo y equipo. Si un extracto se agota, el sistema mantiene su historia y los resultados de control; «cero volumen» no equivale a borrar el registro.

10. CONTROL DE CALIDAD DE LA MUESTRA Y SUS DERIVADOS

10.1. Tres dimensiones: identidad, contenido e integridad

El control de calidad debe responder al menos a tres preguntas. Identidad: ¿es la muestra del donante y órgano declarados? Contenido: ¿contiene la población, tejido o molécula de interés en cantidad suficiente? Integridad: ¿se ha preservado de forma compatible con el ensayo? A ellas se añade una cuarta dimensión documental: ¿podemos demostrar cómo se obtuvo y manejó? Un resultado aislado no cubre las cuatro.

La estrategia de control se basa en riesgo y puede ser universal, por muestreo o específica de una cesión. No resulta razonable consumir cada alícuota para medirlo todo, pero tampoco liberar una serie sin evidencia. Se define frecuencia, tamaño de muestra, criterios de aceptación, controles, acción ante fallo y relación entre unidad analizada y lote representado. Si una sección histológica controla un fragmento adyacente, debe declararse esa inferencia.

10.2. Criterios y resultados

Los umbrales se vinculan al método y al uso. El mismo ARN puede fallar para transcriptómica de moléculas largas y servir para una PCR de amplicón corto. El informe de calidad identifica muestra, método, fecha, equipo, unidades, resultado, criterio y decisión. No se redondea un valor para hacerlo conforme ni se sustituye «por debajo del límite de cuantificación» por cero.

Cuando una muestra falla, se evalúa alcance: una alícuota, un lote, un equipo, una fase o toda la colección. Se bloquean unidades relacionadas si existe riesgo, se investiga causa y se informa a receptores afectados. Si ya se distribuyó material, el biobanco mantiene un mecanismo de retirada o aviso. Repetir el control con resultado favorable puede corregir una medición errónea, pero no justifica ignorar la primera sin investigación.

10.3. Comparabilidad temporal y entre nodos

En una red, el mismo nombre de producto debe significar condiciones comparables. Se armonizan procedimientos, unidades, controles y vocabulario; se realizan comparaciones interlaboratorio cuando sean útiles. Si un nodo cambia tubo, centrífuga, reactivo o plataforma, evalúa el impacto y documenta equivalencia. Los lotes anteriores no se recodifican como si siempre hubieran seguido el método nuevo.

11. CONSERVACIÓN, RECIPIENTES Y ESTRATEGIA DE ALMACENAMIENTO

11.1. Temperatura según matriz y finalidad

La temperatura de almacenamiento se elige por estabilidad, duración, frecuencia de acceso, coste y riesgo. No toda muestra necesita criogenia ni todo material permanece estable indefinidamente. Los bloques FFPE se conservan en ambiente controlado, protegido de calor, humedad y plagas; los ácidos nucleicos, plasma y tejidos congelados suelen requerir congelación profunda según uso; células viables pueden necesitar temperaturas por debajo de la transición vítrea para preservar función.

Los rangos son orientativos y deben convertirse en especificaciones del producto. ISBER 2023 señala la ventaja de la fase vapor a temperaturas de −150 °C o inferiores para materiales criogénicos, al reducir riesgos de contacto y contaminación respecto a inmersión líquida ¹¹. No obstante, un sistema de vapor mal cargado o sin mapeo puede presentar zonas más calientes. La altura de bandejas y nivel de nitrógeno forman parte del control.

11.2. Recipiente y cierre

El recipiente debe soportar temperatura, presión, centrifugación, disolventes y manipulación previstas; tener baja adsorción cuando sea relevante y un cierre que mantenga integridad. Para criogenia se usan viales expresamente certificados. Un tubo corriente puede agrietarse o permitir entrada de nitrógeno líquido; al calentarse, el líquido atrapado se expande y puede proyectar el cierre. Los crioviales se inspeccionan y no se sobrellenan.

Las etiquetas y tintas se validan frente a humedad, escarcha, alcohol, xileno y ultrafrío. El código legible por máquina reduce transcripción, pero debe existir texto humano mínimo para contingencia. La etiqueta no incluye identificadores directos innecesarios y su adhesión no invade roscas ni impide lectura del nivel. Reetiquetar exige doble verificación y conservación del vínculo anterior.

11.3. Ubicación, redundancia y acceso

El LIMS registra sala, equipo, compartimento, rack, caja y posición. La ubicación debe actualizarse en el momento del movimiento, preferentemente por escaneo. Una búsqueda física prolongada calienta muestras vecinas y aumenta errores. Las colecciones críticas pueden dividirse entre equipos o ubicaciones independientes para no depender de un único fallo; la decisión se basa en riesgo, valor y capacidad de recuperación.

Se mantiene capacidad de respaldo suficiente. ISBER recomienda planificar al menos el volumen del mayor equipo cuando sea razonable y contar con procedimientos de transferencia probados ¹¹. Un congelador «de reserva» lleno, desenchufado o sin mapeo no es contingencia. También se planifican cajas, racks, carros, EPI, personal y tiempo para la mudanza.

11.4. Excursiones y ciclos térmicos

El punto de consigna no equivale a temperatura de cada muestra. Aperturas, carga, descongelación, zonas de puerta y fallo de juntas crean gradientes. El mapeo identifica puntos calientes y fríos y guía ubicación de sondas. Toda excursión se evalúa por duración, temperatura, matriz y evidencia; se vincula a las unidades afectadas. Los ciclos de congelación-descongelación incluyen descongelaciones parciales: sacar una caja repetidamente puede dañar tubos aunque nunca lleguen a líquido.

12. EQUIPAMIENTO NECESARIO

El equipamiento deriva del catálogo de productos y del análisis de riesgos. Un biobanco de bloques FFPE no necesita el mismo parque que uno de células viables. La compra considera desempeño, capacidad, ergonomía, limpieza, calibración, mantenimiento, consumibles, compatibilidad informática, respaldo y coste de ciclo de vida. Todo equipo crítico tiene responsable, identificador, estado, ubicación, manual, registros y plan ante fallo.

12.1. Cabina biológica y campana química

La cabina de seguridad biológica clase II protege muestra, trabajador y ambiente frente a aerosoles biológicos si se usa correctamente. No está diseñada para grandes cantidades de vapores tóxicos. La campana química extrae vapores, pero no garantiza protección del producto ni contención microbiológica. Elegir una u otra depende del peligro; si la tarea combina muestra fresca y formaldehído, se rediseña el proceso con prevención, no se improvisa un equipo híbrido.

12.2. Automatización

La automatización mejora reproducibilidad y trazabilidad, pero introduce dependencias de software, puntas, calibración, arrastre y mapas de placa. Antes de uso se verifican exactitud, precisión, volúmenes extremos, lectura de códigos, detección de coágulos y recuperación tras interrupción. Las reglas de trabajo se versionan. Una actualización de software que modifica pipeteo o exportación de datos se gestiona como cambio.

13. INSTALACIONES, CUALIFICACIÓN, MANTENIMIENTO Y MONITORIZACIÓN

13.1. Diseño por flujos y riesgos

La instalación separa recepción, cuarentena, procesamiento limpio, trabajo potencialmente contaminante, extracción química, almacenamiento, expedición y residuos según la actividad. Los recorridos evitan cruces innecesarios entre material limpio y sucio. Suelos, superficies y mobiliario deben resistir limpieza, desinfectantes y derrames. El acceso se limita por función; visitantes entran acompañados y queda registro en áreas críticas.

La sala de congeladores necesita carga estructural, disipación térmica, ventilación, drenaje o contención cuando proceda, electricidad redundante y espacio para mantenimiento y transferencia. Los tanques de nitrógeno requieren ventilación adecuada y monitorización de oxígeno, porque el gas desplaza aire sin olor ni aviso sensorial. La alarma del oxímetro se sitúa y prueba de forma que el personal no tenga que entrar en una atmósfera peligrosa para reconocerla.

13.2. Cualificación y verificación

Antes de liberar un equipo se comprueba instalación, operación y desempeño conforme a la criticidad. La cualificación de instalación confirma emplazamiento, suministros y configuración; la operacional prueba funciones, alarmas y límites; la de desempeño demuestra funcionamiento en carga y condiciones reales. No es necesario convertir cada pequeño equipo en un expediente desproporcionado, pero sí aportar evidencia suficiente según riesgo.

El mapeo térmico se realiza antes del uso, con carga representativa, y se repite tras cambios relevantes, reparación o según programa. Identifica zonas extremas, tiempo de recuperación tras apertura y posición de la sonda de control. Las sondas se calibran con trazabilidad metrológica y deben ser independientes del controlador cuando sea posible. ISBER 2023 recomienda monitorización automática continua, comprobaciones manuales y alarmas remotas ¹¹.

13.3. Mantenimiento y calibración

El mantenimiento preventivo sigue fabricante, uso, ambiente e historial. Se revisan juntas, filtros, condensadores, baterías, niveles, rotores, cierres y alarmas. La calibración aplica a magnitudes que influyen en el resultado: temperatura, volumen, tiempo, masa, fuerza o velocidad. Una pegatina vigente no sustituye a revisar el certificado, incertidumbre y rango utilizado. Si un equipo queda fuera de tolerancia se evalúan resultados desde la última evidencia válida.

13.4. Alarmas y respuesta

Los límites de alarma deben avisar antes de que la muestra alcance condición dañina, evitando a la vez falsas alarmas crónicas. Se define retardo, escalado, contactos y acción por horario. Las alarmas se prueban de extremo a extremo: sonda, transmisión, llamada, respuesta, acceso y corrección. Recibir un correo no demuestra que alguien pueda entrar de noche o trasladar mil cajas.

14. LIMS, TRAZABILIDAD, DATOS Y CONFIDENCIALIDAD

14.1. Trazabilidad de extremo a extremo

La trazabilidad permite reconstruir la historia completa desde donación hasta uso: identidad codificada, consentimiento, obtención, transporte, recepción, transformaciones, controles, ubicaciones, excursiones, descongelaciones, cesiones, remanente y disposición final. También debe funcionar hacia atrás: dado un resultado o vial, localizar muestra progenitora, donante, lote, equipo y usuarios autorizados. La pregunta 142 del examen SAS 2025 condensó este principio en «historial completo».

El modelo de datos mantiene relaciones padre-hijo. Un tubo de sangre origina plasma, capa leucocitaria y células; el plasma produce cuatro alícuotas; dos se ceden y una se descongela. Cada entidad conserva identificador y estado. Sobrescribir el volumen anterior elimina historia; se registra un evento con valor previo, nuevo, fecha, motivo y usuario. Las correcciones dejan pista de auditoría.

14.2. Identificadores y etiquetas

Los identificadores deben ser únicos, persistentes y no semánticos. No contienen datos directos que faciliten reidentificación. Los códigos de barras lineales o bidimensionales se eligen por tamaño, densidad y entorno; los lectores se verifican bajo escarcha y con guantes. Si un código falla, existe procedimiento de identificación manual segura, doble comprobación y reetiquetado documentado.

14.3. Validación del sistema

El LIMS se valida para los usos previstos: altas, reglas de consentimiento, genealogía, ubicaciones, consultas, cesiones, inventario, auditoría y copias. Se prueban roles, datos obligatorios, cálculos, interfaces, migración, concurrencia, bloqueo y recuperación. Las hojas de cálculo auxiliares pueden convertirse en sistemas críticos sin control; si influyen en selección o liberación, necesitan gobernanza equivalente según riesgo.

La copia de seguridad se separa del sistema productivo y se prueba restaurando, no solo comprobando que un trabajo automático terminó. El plan define objetivos de pérdida de datos y tiempo de recuperación. En una caída, los formularios de contingencia preservan identificadores, movimientos y responsables; al restablecer el servicio se reconcilian con doble control para evitar ubicaciones fantasma.

14.4. Protección de datos

Los datos de salud y genéticos son categorías especialmente protegidas. Se aplica base jurídica, finalidad, minimización, seudonimización, control por rol, autenticación, cifrado cuando proceda, registro de accesos, conservación limitada y gestión de incidentes. La clave que vincula código y persona se separa y limita a quienes necesitan reidentificar para funciones autorizadas, como retirada del consentimiento o actualización clínica.

El investigador recibe los datos mínimos aprobados. Las combinaciones raras de edad, diagnóstico, centro y fecha pueden reidentificar aunque no haya nombre; el riesgo se evalúa en cada extracción. Los datos derivados vuelven a gobernanza cuando el acuerdo lo exige, y las publicaciones deben reconocer al biobanco sin revelar donantes. El RGPD no prohíbe investigación; exige salvaguardas y responsabilidad demostrable ¹⁹.

14.5. Seguridad y bioseguridad informacional

La bioseguridad protege frente a exposición accidental; la bioseguridad física e informacional también debe prevenir pérdida, robo, sabotaje o uso malicioso. ISBER 2023 aconseja un enfoque basado en riesgo que limite acceso a muestras y datos sensibles ¹¹. Se revisan privilegios al cambiar funciones, se retiran cuentas, se protegen exportaciones y se registra destrucción segura. Un inventario exacto permite detectar desapariciones, no solo encontrar tubos.

15. ACCESO, CESIÓN, PREPARACIÓN Y TRANSPORTE

15.1. Selección para una solicitud

La distribución comienza con una especificación científica suficiente. El investigador define criterios, técnica, cantidad y datos; el biobanco verifica consentimiento, dictamen ético, disponibilidad, calidad y restricciones. La selección queda reproducible: consulta utilizada, versión diagnóstica, fecha y operador. Si el diagnóstico cambió desde la captación, se actualiza o comunica. El control histológico puede repetirse cerca del material que se entrega cuando la heterogeneidad lo aconseja.

La Ley 14/2007 exige proporcionar la cantidad mínima necesaria y permite recuperar costes justificables sin convertir la donación en actividad lucrativa ¹. La escasez obliga a ponderar mérito, factibilidad, consumo y posibilidad de generar derivados. Un comité puede proponer un diseño que use menos material o una prueba piloto. La decisión y sus conflictos de interés se documentan.

15.2. Acuerdo y documentación de cesión

El acuerdo identifica proveedor y receptor, proyecto, material, datos, finalidad, duración, seguridad, restricciones de uso y transferencia, propiedad intelectual si procede, publicaciones, reconocimiento, resultados, incidencias y destino del remanente. También define si puede intentarse reidentificación —normalmente se prohíbe al receptor— y quién comunica hallazgos potencialmente relevantes. La cesión se registra por alícuota, lote, fecha y destinatario.

El Real Decreto 1716/2011 prevé que la cesión se formalice por escrito y se realice, como regla, de forma anónima o disociada, sin impedir que los datos clínicos adicionales necesarios se obtengan a través del centro de origen bajo control ². La solución preserva valor longitudinal sin entregar al investigador una clave clínica directa.

15.3. Preparación y cadena de frío

La preparación se efectúa en una zona controlada con lista de picking. Se verifica identidad, cantidad, estado, posición y etiquetado; un segundo control independiente se reserva para puntos de alto riesgo. Las cajas de envío minimizan tiempo fuera del almacenamiento. Se emplean acumuladores, hielo seco o dry shipper de nitrógeno según temperatura validada. Un dry shipper debe estar correctamente cargado y no contener nitrógeno libre.

La cualificación del embalaje demuestra que mantiene el rango durante el peor escenario razonable: duración, estación, ruta, carga mínima y máxima y retraso. El registrador de temperatura se configura y vincula al envío. La recepción sabe cómo descargar datos y qué hacer si hay una excursión. Añadir más hielo seco sin considerar ventilación, peso o duración no sustituye la validación.

15.4. Clasificación y embalaje seguro

Las muestras humanas se clasifican por el riesgo real y la normativa de transporte. Cuando corresponden a sustancia biológica categoría B, se identifican como UN 3373 y cumplen la instrucción de embalaje aplicable; materiales con alta probabilidad de agentes capaces de causar enfermedad grave pueden pertenecer a categoría A. El hielo seco es mercancía peligrosa propia, UN 1845, y el nitrógeno líquido o los equipos criogénicos tienen requisitos específicos. Personal formado determina clasificación, marcas, etiquetas y documentación ¹⁸.

Para líquidos se usa recipiente primario estanco, secundario estanco, absorbente suficiente y embalaje exterior resistente. Los primarios se separan para evitar rotura. El hielo seco queda fuera del secundario y el embalaje permite liberar CO₂; nunca se cierra herméticamente un contenedor que genera gas. NCI 2026 resume condiciones de envío orientativas —refrigerado, congelado, hielo seco o criogénico—, pero exige cumplir IATA y normativa local y validar el producto ¹².

15.5. Recepción y cierre

El receptor confirma bulto, sellos, unidades, temperatura y condición, y comunica discrepancias. La cadena de custodia registra entrega y aceptación. El biobanco conserva prueba de envío y evalúa incidentes. Los remanentes se devuelven, destruyen o conservan solo según el acuerdo; no pueden incorporarse silenciosamente a otra colección. Los resultados de calidad y datos derivados que se devuelvan se enlazan a las unidades originales.

16. BIOSEGURIDAD BIOLÓGICA

16.1. Evaluación de riesgo por tarea

El WHO Laboratory Biosafety Manual, cuarta edición de 2020, abandona una respuesta basada solo en etiquetas y pide evaluar agente posible, concentración, volumen, vía de exposición, procedimiento, equipo, personal y consecuencias ¹³. El Real Decreto 664/1997 obliga a identificar y evaluar la exposición, clasifica agentes en cuatro grupos y establece medidas de contención según actividad y riesgo ¹⁴. Grupo del agente, nivel del laboratorio y medidas de una tarea son conceptos relacionados, pero no intercambiables.

Las muestras humanas frescas se manejan con precauciones estándar porque el estado infeccioso puede ser desconocido. La fijación o congelación no garantizan inactivación universal. La evaluación considera patógenos endémicos, origen, procedimiento y posibilidad de propagación. Un volumen pequeño no elimina el riesgo de inoculación; una gran bolsa de plasma no implica por sí sola generación de aerosol.

16.2. Jerarquía de controles

Primero se elimina o sustituye la tarea cuando sea posible; después se aplican controles de ingeniería, organización y, por último, equipos de protección individual. Sistemas cerrados, rotores sellados, cabinas, ventilación y dispositivos de seguridad son más fiables que depender solo de conducta. Los procedimientos limitan acceso, prohíben pipeteo oral, separan áreas, establecen higiene de manos y definen limpieza, exposición y residuos.

16.3. Cabinas y centrifugación

La cabina clase II necesita certificación periódica y tras traslado o reparación relevante. Antes de trabajar se comprueba estado y flujo; se colocan materiales sin bloquear rejillas y se separa entrada limpia de salida contaminada. Los movimientos son lentos, no se introducen llamas y la luz ultravioleta no sustituye limpieza. Los residuos salen contenidos. El usuario debe conocer tiempo de purga definido por el procedimiento.

Las centrifugadoras se cargan con masas equilibradas y tubos compatibles. Rotores y cubetas se inspeccionan por corrosión, fisura o sello. Ante rotura, se detiene el acceso, se espera la sedimentación de aerosoles según procedimiento y se abre el sistema sellado en cabina cuando sea apropiado. Se registra el incidente y se revisan muestras potencialmente contaminadas.

16.4. Descontaminación, residuos y exposición

El desinfectante se selecciona por microorganismo, superficie, carga orgánica y compatibilidad; se respetan concentración y tiempo de contacto. La limpieza física precede cuando la materia orgánica reduce eficacia. La autoclave se valida por carga y ciclo con controles apropiados. Un material descontaminado no pierde automáticamente su carácter químico peligroso.

Punzantes se eliminan inmediatamente en recipiente rígido, sin reencapuchar. Ante pinchazo o salpicadura se interrumpe la tarea, se realiza primera atención, se notifica y se activa evaluación laboral sin demora. La formación incluye vacunación indicada, uso de EPI, derrames y exposición. La competencia se observa en la práctica, no se demuestra solo con firma de asistencia.

17. RIESGOS QUÍMICOS, CRIOGÉNICOS Y FÍSICOS

17.1. Formaldehído, disolventes y reactivos

El formaldehído es un agente cancerígeno y sensibilizante. El Real Decreto 665/1997, modificado y renombrado por el Real Decreto 612/2024, exige evaluar, sustituir cuando sea técnicamente posible, utilizar sistemas cerrados o extracción en origen y reducir la exposición al mínimo ¹⁵. El EPI complementa, no reemplaza, la eliminación, sustitución o ingeniería. La manipulación de formol se realiza en recipientes compatibles, con extracción y kit específico; la cabina biológica no es campana química.

Alcoholes y otros disolventes pueden ser inflamables; xileno y colorantes presentan toxicidad propia. Se consulta la ficha de datos de seguridad, se limita cantidad en mesa, se almacenan por compatibilidad, se controlan fuentes de ignición y se segregan residuos. Los reactivos no se trasvasan a recipientes de bebida ni quedan sin etiqueta. Mezclar un derrame químico con hipoclorito sin conocer su composición puede generar gases o reacciones peligrosas.

17.2. Nitrógeno líquido

El nitrógeno líquido causa quemaduras frías, fragiliza materiales y se expande enormemente al evaporarse. El gas desplaza oxígeno; una fuga en sala mal ventilada puede producir pérdida de conciencia sin olor ni irritación previa. La NTP 340 del INSST describe el riesgo de asfixia por suboxigenación con gases inertes y la NTP 383 aborda gases licuados a baja temperatura ¹⁶¹⁷. Son notas técnicas preventivas, no sustituyen la evaluación obligatoria del centro.

La instalación dispone de ventilación, monitor fijo de oxígeno, alarma audible y visible, acceso controlado y procedimiento de emergencia. No se entra a investigar una alarma sin atmósfera segura y medios autorizados. El suministro, las mangueras, válvulas y alivios de presión se inspeccionan. Nunca se encierra nitrógeno líquido en un recipiente no diseñado o sin vía de alivio.

Para trasvasar se usan pantalla facial u ocular adecuada, guantes criogénicos holgados que puedan retirarse rápido, bata o protección de brazos, delantal cuando el volumen lo justifique, pantalón largo y calzado cerrado resistente. Los guantes criogénicos protegen de salpicadura y contacto breve; no se sumergen. Se retiran joyas o elementos que atrapen líquido. Los recipientes grandes se mueven con ayudas diseñadas y sin viajar en ascensor cerrado junto con personas cuando el procedimiento lo prohíba.

17.3. Hielo seco y viales presurizados

El hielo seco está a muy baja temperatura y sublima a CO₂, que también desplaza oxígeno y puede acumularse en vehículos, cámaras o embalajes. Se manipula con protección térmica y ventilación; el contenedor permite liberar gas. Un paquete hermético puede romper. Antes de abrir un criovial se considera si entró nitrógeno líquido; el calentamiento puede causar sobrepresión. Se utiliza protección facial y dispositivo adecuado.

17.4. Riesgos eléctricos, incendio, ergonomía y cargas

Ultracongeladores y sistemas de respaldo demandan potencia, puesta a tierra y circuitos adecuados. No se conectan equipos críticos a regletas improvisadas. La acumulación de escarcha y condensación crea resbalones; los racks fríos y cajas pesadas causan atrapamiento y sobreesfuerzo. Se diseñan alturas, ayudas y tiempos de trabajo para evitar posturas extremas. El ruido, calor y trabajo nocturno también entran en la evaluación.

Los planes de incendio consideran productos inflamables, equipos eléctricos y evacuación. El grupo electrógeno se prueba con carga. La puerta de una sala de criogenia debe poder abrirse y no bloquearse por hielo o presión. En zonas de alto riesgo se evita trabajar solo o se establece vigilancia efectiva.

18. SISTEMA DE CALIDAD Y CONTINUIDAD OPERATIVA

18.1. ISO 20387 y buenas prácticas

ISO 20387:2018, primera edición, establece requisitos generales para competencia, imparcialidad y operación coherente de biobancos, incluido control de calidad de material biológico y datos ¹⁰. A 28 de agosto de 2026 sigue siendo la edición publicada vigente en la ficha ISO. La revisión aparece en fase FDIS y se prevé que la sustituya, pero un borrador final no debe citarse como norma ya publicada. Esta distinción de vigencia es examinable: «más nuevo» no siempre significa «vigente».

ISBER Best Practices, quinta edición de 2023, aporta recomendaciones operativas sobre equipos, almacenamiento, datos, transporte, seguridad y continuidad ¹¹. NCI publicó en enero de 2026 la cuarta edición de sus mejores prácticas, especialmente útil para preanalítica, calidad, anotación, almacenamiento y distribución ¹². Son referencias de buenas prácticas; el alcance legal sigue definido por normas europeas, estatales y autonómicas.

18.2. Documentos y control de cambios

El sistema ordena política, manual o descripción del sistema, procedimientos, instrucciones, formularios y registros. Cada documento tiene código, versión, aprobación, fecha y revisión. La copia vigente está en el punto de uso y las obsoletas se retiran sin borrar historia. Los registros deben ser legibles, contemporáneos, atribuibles y protegidos; completar al final del turno una hora que no se anotó no es trazabilidad.

Un cambio de tubo, reactivo, centrífuga, etiqueta, rango térmico, proveedor, software o ubicación se evalúa antes de implantar. Se identifican productos y estudios afectados, se verifica comparabilidad, se forma al personal y se actualizan documentos. Los cambios urgentes se controlan y revisan después. La innovación no exime de demostrar que el producto sigue siendo apto.

18.3. Personal y competencia

Cada puesto tiene funciones y autorización. La formación inicial combina teoría y práctica supervisada. La competencia se evalúa observando identificación, pipeteo, centrifugación, criogenia, respuesta a alarma, uso de LIMS y gestión de desviaciones. Se reevalúa periódicamente y tras ausencias, errores o cambios. La autorización puede limitarse por tarea; saber procesar plasma no habilita a mantener un tanque de nitrógeno.

18.4. Indicadores, auditoría y acciones correctivas

Son indicadores útiles: porcentaje de muestras fuera de intervalo, rechazos y aceptaciones condicionadas, discrepancias de inventario, excursiones, alarmas sin respuesta, fallos de equipo, disponibilidad frente a demanda, tiempo de preparación, rendimiento de extracción, viabilidad, contaminación, satisfacción del usuario y publicaciones. Cada indicador necesita definición, denominador, objetivo, frecuencia y responsable.

La auditoría comprueba práctica y evidencia, no solo presencia de documentos. Una no conformidad se contiene, evalúa y corrige; después se analiza causa y se implanta acción correctiva, cuya eficacia se verifica. Tras un vial mal ubicado, localizarlo es corrección; rediseñar el escaneo, formar y demostrar reducción de discrepancias es acción correctiva. Los casi fallos se estudian porque muestran barreras débiles.

18.5. Continuidad y recuperación

El análisis de impacto identifica equipos, suministros, sistemas, personal y tiempos críticos. El plan cubre fallo eléctrico, avería de congelador, pérdida de nitrógeno, incendio, inundación, ciberincidente, inaccesibilidad del edificio, fallo de proveedor, falta de personal y desastre regional. Define mando, contactos, prioridad, capacidad de respaldo, transporte, comunicación a investigadores y criterios para evaluar muestras.

Los simulacros deben incluir transferencia realista de carga y fallo fuera de horario. Se verifican teléfono, llaves, carros, cajas, EPI, autonomía, rutas y espacio. Tras el evento se reconcilia inventario y se enlaza la excursión a todas las unidades afectadas. No se declara «sin impacto» solo porque el equipo volvió a consigna.

18.6. Retirada y disposición

La retirada del inventario puede deberse a agotamiento, revocación, fin autorizado, degradación, identidad dudosa, riesgo o falta de valor. Se aprueba, documenta y ejecuta de forma segura, preservando los registros que deban conservarse. Destruir físicamente un tubo no borra su historia, cesiones ni datos ya producidos. Las decisiones masivas requieren gobernanza y análisis ético, científico y económico.

19. PERLAS DE EXAMEN Y ESTRATEGIA DE REPASO

Las siguientes perlas proceden de los enunciados y plantillas definitivas aportados. El SAS publica pregunta, opciones y letra, no una argumentación oficial; la explicación de este tema se apoya en la normativa y referencias fechadas. Se han eliminado duplicados de convocatorias, preguntas anuladas y cuestiones dependientes de imagen ²¹.

19.1. Trampas previsibles

• Congelador igual a biobanco: faltan autorización, gobernanza, consentimiento, calidad y acceso regulado.
• Todo excedente puede investigarse: la prioridad diagnóstica no crea por sí sola una base ética o jurídica.
• Consentimiento igual a uso libre: cada proyecto necesita evaluación y debe respetar finalidad y salvaguardas.
• Revocar borra el pasado: detiene el futuro dentro del alcance revocado; los datos ya generados legítimamente se conservan.
• Anonimizado igual a codificado: si existe una clave, es seudonimización y siguen aplicándose normas de datos personales.
• Una temperatura para todo: matriz, analito, duración y uso determinan conservación.
• Un control para todo: morfología, cantidad, integridad, viabilidad, autenticidad y esterilidad son dimensiones distintas.
• Cabina biológica para formol: aerosoles biológicos y vapores químicos requieren controles diferentes.
• Alarma igual a respuesta: continuidad exige escalado, acceso, capacidad y simulacro.
• FDIS igual a norma vigente: a 28/08/2026 continúa publicada ISO 20387:2018 hasta que la revisión sea formalmente emitida.

20. REFERENCIAS, VIGENCIA Y PALABRAS CLAVE

Vigencia de fuentes: corte explícito

Actualizado y comprobado el 28 de agosto de 2026. Como normas vinculantes se han utilizado la Ley 14/2007, el Real Decreto 1716/2011, los Decretos andaluces 1/2013, 49/2017 y 8/2020, el RGPD, la Ley Orgánica 3/2018 y los Reales Decretos 664/1997 y 665/1997 en sus textos consolidados. Los procedimientos locales deben revisarse tras cualquier modificación normativa o instrucción de la autoridad competente.

Como estándar de biobancos se usa ISO 20387:2018, que continúa siendo la edición publicada a la fecha de corte. La ficha ISO muestra una revisión en fase FDIS, previsiblemente sustitutiva, pero no se ha tratado como edición vigente. Como recomendaciones técnicas se utilizan ISBER, quinta edición de 2023 —traducción española disponible desde 2025—, NCI Best Practices, cuarta edición de enero de 2026, y WHO Laboratory Biosafety Manual, cuarta edición de 2020. Sus recomendaciones se someten a legislación, evaluación de riesgos y validación local.

Para la práctica andaluza se han contrastado el Decreto 1/2013, el catálogo y páginas institucionales del BB-SSPA, la guía de uso de muestras versión 2 de 2022, la guía CEI versión 2 de 2023 y la información oficial de nSIBAI. Las páginas operativas pueden cambiar antes que las normas; por ello, formularios, contactos, cartera, costes y rutas de solicitud deben comprobarse en el Portal del Investigador o documentación oficial vigente en el momento de uso.

No se han fijado como universales tiempos de isquemia, velocidades de centrifugación, volúmenes, tamaños de alícuota, concentraciones de crioprotector ni duración de conservación. Esos parámetros dependen de matriz, analito, ensayo, equipo y finalidad y deben proceder de un procedimiento validado. Las temperaturas citadas describen rangos técnicos habituales y recomendaciones fechadas, no una garantía indefinida de estabilidad.

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